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霍乱弧菌O1型及肠毒素基因核酸检测试剂盒(荧光PCR法)-冻干

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所属分类:感染类疾病

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霍乱弧菌O1型及肠毒素基因核酸检测试剂盒(荧光PCR法)-冻干

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产品简介

[产品名称] 霍乱弧菌O1型及肠毒素基因核酸检测试剂盒(荧光PCR)

[包装规格]  20人份/盒、50人份/

[预期用途]

本试剂盒适于急性胃肠炎患者粪便样本中的霍乱弧菌O1型及肠毒素基因核酸实现定性检测,为霍乱的临床诊断和治疗提供有效的辅助手段。

霍乱弧菌(vibrio cholerae)通过霍乱毒素引起的烈性肠道传染病,具有发病急、传播快、流行范围广等特征,是国际检疫的甲类传染病之一。根据霍乱弧菌O抗原的差异,可将其分为139个血清群,能引起霍乱的主要有 2 种血清型,O1群和 O139 群,在全球范围的7 次霍乱大流行均是由O1 群霍乱弧菌所引发[1]。霍乱的强致病作用主要是由霍乱弧菌分泌的霍乱肠毒素(Cholera toxinCT)导致的,霍乱肠毒素是由基因ctx编码的,因此在霍乱O1 群血清型中,不产生霍乱毒素CT的菌株也不会导致霍乱,当然也不会引发霍乱流行[2]。建立简便、特异、快速的病原学诊断方法,对于霍乱弧菌的临床诊断具有重要意义。

[检验原理]

本试剂盒采用PCR扩增和荧光探针相结合的方法,选择霍乱弧菌O1型及肠毒素基因特异性的保守区域作为检测靶基因,设计荧光检测的特异性引物探针,其中霍乱弧菌O1型特异性探针5’标记为FAM荧光基团,3’BHQ1淬灭基团;霍乱肠毒素基因特异性探针5’标记为HEX荧光基团,3’BHQ1淬灭基团。同时引入内源内参,探针5’端标记为ROX荧光基团,3’端淬灭基团为BHQ2。扩增过程中通过Taq酶的DNA聚合酶活性和5’-3’ 外切酶活性实现了PCR产物形成与荧光信号的累积完全同步,从而对样本中的霍乱弧菌O1型、霍乱肠毒素及内参基因的定性检测,为霍乱的临床诊断和治疗提供有效的辅助手段。

 

[储存条件及有效期]

  1. 未开封的试剂盒:应在避光、温度不高于30℃下储存,有效期12个月。
  2. 冻干的核酸反应液复溶后立即进行RT-PCR检测,否则应避光储存于-25℃-15℃,有效期为1周,避免反复冻融(应限制在2次以内)。
  3. 冻干的阳性对照复溶后,应储存于-25℃-15℃,有效期为1周,避免反复冻融(应限制在2次以内)。
  4. 运输条件: 低于37℃可稳定运输1个月。
  5. 生产日期、生产批号及失效日期见包装标签。

[适用仪器]

QuantStudio®5实时荧光定量PCR系统、宏石SLAN-96P全自动医用PCR分析系统、LightCycler® 480荧光定量PCR系统、杭州博日FQD-96A荧光定量PCR仪、雅睿MA-6000荧光定量PCR仪、伯乐BioRad CFX96实时荧光定量PCR仪和伯乐CFX Opus 96实时定量PCR仪。

[样本要求]

  1. 样本采集:新鲜患者粪便。

使用粪便采集器采集艰难梭菌疑似感染患者的粪便样本于一次性无菌容器中,盖紧管盖。标本量要求:

固态样本:采集量约为直径2cm左右的小球大小。

液态样本:采集量约为5mL

  1. 样本采集注意事项:粪便标本应在发病首日采集,至多不能超过发病急性期(4872h),此时为稀、软便,病毒排出量最多。
  2. 存放

采集的样本应尽快送检,24小时内无法检测的样本则应置于-18℃以下保存,保存时间不超过2个月,-70℃以下长期保存。样本应设立专库或专柜单独保存。

 

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