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扎伊尔型埃博拉病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)-冻干

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所属分类:感染类疾病

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扎伊尔型埃博拉病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)-冻干

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0513-80562880
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产品简介

产品名称】

通用名称:扎伊尔型埃博拉病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)说明书

包装规格】  20人份/盒、50人份/

预期用途】

本试剂盒适用于对疑似扎伊尔型埃博拉病毒(Zaire ebolavirusZEBOV)感染患者的血清或血浆样本中的扎伊尔埃博拉病毒核酸实现定性检测,为扎伊尔型埃博拉病毒感染患者的诊断提供辅助手段。检测结果应结合临床诊断,最终诊断应紧密结合其他临床指标综合考虑。

埃博拉病毒属丝状病毒科(Filiviridae),为不分节段的单股负链RNA病毒。病毒呈长丝状体,毒粒长度平均1000nm,直径约100nm。埃博拉病毒基因组是不分节段的负链RNA,大小为18.9kb,编码7个结构蛋白和1个非结构蛋白。埃博拉病毒可分为扎伊尔型、苏丹型、本迪布焦型、塔伊森林型和雷斯顿型。其中扎伊尔型、苏丹型已经报到造成较多人群感染死亡。埃博拉出血热(Ebola HemorrhagicFeverEHF)是由埃博拉病毒(Ebolavirus)引起的一种急性出血性传染病。人主要通过接触病人或感染动物的体液、分泌物和排泄物等而感染,临床表现主要为突起发热、出血和多脏器损害。埃博拉出血热病死率高,可达50%-90%。目前埃博拉病毒确诊的方法主要为实验室检测,包括病原学检测和血清学检测两个方面。病原学检测有ELISA法检测血标本中病毒抗原,RT-PCR法等扩增方法检测核酸,用VeroHela等细胞进行病毒分离培养;血清学检测有捕捉ELISA法检测血清特异性IgM抗体,ELISA、免疫荧光等方法检测血清特异性IgG抗体。

检验原理】

本检测试剂盒采用荧光探针实时PCR技术,在扎伊尔型埃博拉病毒的特异性保守区域设计特异性引物探针,探针的报告荧光基团为FAM,淬灭荧光基团为BHQ1,同时选择人ACTB基因作为内标,设计特异性引物探针,报告荧光基团为VIC,淬灭荧光基团为BHQ1。扩增过程中通过Taq酶的5-3′外切酶活性实现了PCR产物形成与荧光信号的累积的完全同步,从而对埃博拉病毒感染患者的血清或血浆样本中的埃博拉病毒核酸实现定性检测,为埃博拉病毒感染患者的诊治提供辅助手段。

 

储存条件及有效期】

  1. 未开封的试剂盒:应在避光、温度不高于30℃下储存,有效期12个月。
  2. 冻干的核酸反应液复溶后立即进行RT-PCR检测,否则应避光储存于-25℃-15℃,有效期为1周,避免反复冻融(应限制在2次以内)。
  3. 冻干的阳性对照复溶后,应储存于-25℃-15℃,有效期为1周,避免反复冻融(应限制在2次以内)。
  4. 运输条件: 低于37℃可稳定运输1个月。
  5. 生产日期、生产批号及失效日期见包装标签。

适用仪器】

QuantStudio®5实时荧光定量PCR系统、宏石SLAN-96P全自动医用PCR分析系统LightCycler® 480荧光定量PCR系统、杭州博日FQD-96A荧光定量PCR雅睿MA-6000荧光定量PCR伯乐BioRad CFX96实时荧光定量PCR伯乐CFX Opus 96实时定量PCR

样本要求】

  1. 样本采集

1.1 新鲜血清

样本采集:用无菌注射器采集被检者3-5mL静脉血于真空采血管中(最好带分离胶),室温放置不得超过4小时,3000rpm离心10分钟,吸取上层血清(切勿吸入红细胞)转入另一无菌离心管中备用。

1.2 血浆

无菌注射针头2ml静脉血于含有抗凝剂(EDTA·K2和枸橼酸钠)的无菌离心管中,室温放置不得超过4小时,室温1,600rpm离心20分钟,分离血浆(切勿吸入红细胞),转入无菌离心管中备用。不可使用肝素钠作为抗凝剂的血浆样本。

  1. 样本采集注意事项:样本在采集、保存和转移时避免污染。

样本安全性:所有样本均视为有潜在的感染性,操作时按国家相关标准执行。

  1. 存放

采集的样本应尽快送检,24小时内无法检测的样本则应置于-18℃以下保存,保存时间不超过2个月,-70℃以下长期保存。样本应设立专库或专柜单独保存。

  1. 不合理的样本采集、运输及处理可能会到导致假阴性检测结果。因此样本处理要严格按照国家卫生和计划生育委员会发布《埃博拉出血热防控方案》(现行版)进行操作,同时应遵照美国疾病预防控制中心发布的《疑似埃博拉出血热患者样本采集、运输和检测临时指南》操作,根据该指南检测样本类型为疑似埃博拉出血热患者的血液、体液、分泌物样本。
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