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肠道病毒通用型、EV71及CoxA16核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

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所属分类:胃肠道疾病

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肠道病毒通用型、EV71及CoxA16核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

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产品简介

产品名称】

通用名称:肠道病毒通用型、EV71CoxA16核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

包装规格】  20人份/盒、50人份/

预期用途】

本产品适用于体外定性检测手足口病患者的咽拭子和疱疹液样本中的肠道病毒、EV71CoxA16核酸,为手足口病患者的诊断提供辅助手段。

手足口病是由肠道病毒引起的传染病,目前共发现108种肠道病毒的血清型,分ABCD四个种群。其中肠道病毒EV71CoxA16是主要病原体。该病多发生于5岁以下儿童,可引起手、足、口腔等部位的疱疹,少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。

检验原理】

本试剂盒采用PCR扩增和荧光探针相结合的方法,针对肠道病毒、EV71CoxA16的高度保守且特异性区域,分别设计荧光检测的引物和探针,肠道病毒检测探针标记为FAM荧光基团,EV71探针标记为ROX荧光基团,CoxA16探针标记为VIC荧光基团。同时引入内参,设计荧光检测的特异性引物探针,探针5’端标记为CY5荧光基团,3’端淬灭基团为BHQ2。在PCR扩增过程中,特异性引物探针分别与各自的靶序列结合,当Taq酶遇到结合在靶序列上的探针时,发挥5′端外切酶功能,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步;通过检测不同的荧光信号变化,实现对手足口病患者的拭子和疱疹液样本中的肠道病毒、EV71CoxA16病毒核酸的定性检测,为肠道病毒和EV71CoxA16病毒感染患者的诊治提供辅助手段。

 

储存条件及有效期】

1.未开封的试剂盒:应在避光、温度不高于30℃下储存,有效期12个月。

2.冻干的核酸反应液和阳性对照品复溶后立即进行检测,未用完的复溶反应液应避光储存于-25℃至-15℃,有效期为1周,避免反复冻融(应不超过2次)。

3.运输条件: 低于37℃可稳定运输1个月。

4.生产日期、生产批号及失效日期见包装标签。

适用仪器】

ABI7500荧光定量PCR仪、QuantStudio®5实时荧光定量PCR系统、宏石SLAN-96P全自动医用PCR分析系统LightCycler® 480荧光定量PCR系统、杭州博日FQD-96A荧光定量PCR雅睿MA-6000荧光定量PCR伯乐BioRad CFX96实时荧光定量PCR伯乐CFX Opus 96实时定量PCR

样本要求】

1.样本采集

1.1咽拭子样本采集

用聚酯纤维头拭子适度用力多次抹擦悬雍垂(腭垂或小舌)后部咽后壁及双侧扁桃体,避免触及舌部,取出后置采样管,折断手接触部位的塑料柄,使拭子浸泡至采样液中,旋紧管盖。经验证,可以使用生理盐水或 Hanks 液等成分的保存液保存咽拭子样本。若使用江苏宏微特斯医药科技有限的样本释放剂(HWTS-3005-7),可将采集的拭子直接放入样本释放剂中。

1.2疱疹液

先用75%的酒精对疱疹周围的皮肤进行消毒,然后用消毒针将疱疹挑破用棉签蘸取疱疹液,迅速将棉签放入内装有3~5ml保存液(维持液或生理盐水,推荐使用维持液)的采样管中,在靠近顶端处折断棉签杆,旋紧管盖并密封。若使用江苏宏微特斯医药科技有限的样本释放剂(HWTS-3005-7),可将采集的拭子直接放入样本释放剂中。

2.样本采集注意事项:样本在采集、保存和转移时避免污染。

样本安全性:所有样本均视为有潜在的感染性,操作时按国家相关标准执行。

3.存放

采集的样本应尽快送检,24小时内无法检测的标本采集好后立即放置于冻存管中,标记好样本名称(或编号)及类型,置于-70℃以下保存。标本应设立专库或专柜单独保存。

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