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单纯疱疹病毒2型核酸检测试剂盒(酶切探针恒温扩增法)

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单纯疱疹病毒2型核酸检测试剂盒(酶切探针恒温扩增法)

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产品简介

【产品名称】单纯疱疹病毒2核酸检测试剂盒(酶切探针恒温扩增法)

【包装规格】50人份/

【预期用途】

本试剂盒用于体外定性检测泌尿生殖道样本中的单纯疱疹病毒2型核酸。

单纯疱疹病毒2 (Herpes Simplex Virus Type 2HSV2) 是被膜、衣壳、核心、囊膜合成的圆形病毒,含双链线性的DNA[1]。疱疹病毒可通过皮肤、粘膜的直接接触或性接触途径进入机体,分为原发性和复发性。生殖道感染主要由HSV2导致,男性患者表现为阴茎溃疡,女性患者则为宫颈、外阴、阴道溃疡。生殖器疱疹病毒初次感染多为隐性感染,除少数有黏膜或皮肤的局部疱疹,多无明显的临床症状,生殖器疱疹感染具有终身带毒、易复发的特性,患者和带毒者都是该病的传染源[2]

在我国,HSV2血清学阳性率约为10.80%~23.56%HSV感染阶段可分为原发性感染和复发感染,HSV2感染者约有60%复发[3]

本试剂盒检测结果不作为患者单纯疱疹病毒2型感染诊断的唯一指标,须结合患者临床特征、其他实验室检查数据,正确判断病原体的感染或定植,制定合理的治疗方案,使治疗安全、有效。

【检测原理】

本试剂盒采用酶切探针恒温扩增技术(Enzymatic Probe Isothermal AmplificationEPIA),针对HSV2的高度保守区域设计特异性引物与含RNA碱基的探针(rProbe),同时加入Bst酶及RNaseH酶等,其中rProbeRNA碱基左、右两端分别标记荧光基团和淬灭基团。在恒定温度下利用Bst酶的DNA聚合酶活性和链置换活性扩增待测靶标,RNaseH酶可切割靶标-探针杂交链上的RNA碱基,使得rProbe的荧光基团和淬灭基团分离从而发出荧光。此外,残留的rProbe RNA碱基左侧片段可作为引物继续延伸形成产物,使得产物进一步累积。荧光信号随着产物的形成不断累积,从而实现对目标核酸的检测。

体系中以重组的松树叶绿体基因质粒作为外源内参,作为对试剂以及操作本身的质控,避免假阴性。

 

【储存条件及有效期】

本试剂盒于-18℃以下避光保存,有效期9个月。开封、反复冻融次数不得多于4次,在-18℃以下的避光条件下运输,可稳定保存5天。

【适用仪器设备】

ABI 7500荧光定量PCR仪、宏石SLAN-96P全自动医用PCR分析系统、LightCycler® 480荧光定量PCR系统,实时荧光恒温检测系统Easy Amp HWTS1600

【样本要求】

  1. 样本采集

用医用棉拭子伸入男性尿道口或女性宫颈口约1-2cm,旋转1周,停留10秒钟后取出,将拭子头放入1ml生理盐水浸泡贴管壁挤压,该样品即为待测样本。

  1. 存放

待测样本在2-8℃保存不超过7天,-18℃以下保存不超过4个月,-70℃以下保存12个月,样本应避免反复冻融,冻融次数不超过4次。

  1. 运输

建议采取液氮、干冰的超低温运输

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