【产品名称】柯萨奇病毒A16型核酸检测试剂盒（酶切探针恒温扩增法）

【包装规格】48人份/盒

【预期用途】

本试剂盒用于体外定性检测人的咽拭子中的柯萨奇病毒A16型核酸。

手足口病主要是由肠道病毒感染引起的急性传染病，该病多发生于5岁以下儿童，可引起手、足、口腔等部位的疱疹，少数患儿可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。引发手足口病的肠道病毒有20多种（型），其中柯萨奇病毒A16（Cox A16）型是引起患儿手足口病的主要病原体之一。

【检测原理】

本试剂盒采用酶切探针恒温扩增技术（Enzymatic Probe Isothermal Amplification，EPIA），针对Cox A16的高度保守区域设计特异性引物与含RNA碱基的探针（rProbe），同时加入Bst酶及RNaseH酶等，其中rProbe的RNA碱基左、右两端分别标记荧光基团和淬灭基团。在恒定温度下利用Bst酶的DNA聚合酶活性和链置换活性扩增待测靶标，RNaseH酶可切割靶标-探针杂交链上的RNA碱基，使得rProbe的荧光基团和淬灭基团分离从而发出荧光。此外，残留的rProbe RNA碱基左侧片段可作为引物继续延伸形成产物，使得产物进一步累积。荧光信号随着产物的形成不断累积，从而实现对目标核酸的检测。

体系中以重组的松树叶绿体基因质粒作为外源内参，作为对试剂以及操作本身的质控，避免假阴性。

【储存条件及有效期】

1. 未开封的试剂盒：应在避光、温度不高于30℃下储存，有效期12个月。
2. 冻干的核酸反应液、阳性对照品及内参对照品复溶后立即进行检测，复溶后的反应液应避光储存于-15℃以下，有效期为1周，避免反复冻融（应不超过2次）。
3. 运输条件: 低于37℃可稳定运输1个月。
4. 生产日期、生产批号及失效日期见包装标签。

【适用仪器设备】

ABI 7500荧光定量PCR仪、宏石SLAN-96P全自动医用PCR分析系统、LightCycler® 480荧光定量PCR系统，实时荧光恒温检测系统Easy Amp HWTS1600。

【样本要求】

1. 样本采集

新鲜采集的咽拭子。

用聚酯纤维头拭子适度用力多次抹擦悬雍垂（腭垂或小舌）后部咽后壁及双侧扁桃体，避免触及舌部，取出后置采样管，折断手接触部位的塑料柄，使拭子浸泡至采样液中，旋紧管盖。经验证，可以使用生理盐水或 Hank’s 液等成分的保存液保存咽拭子样本。若使用江苏宏微特斯医药科技有限的样本释放剂（HWTS-3005-8），可将采集的拭子直接放入样本释放剂中。

2. 储存

采集的样本应尽快送检，24小时内无法检测的标本采集好后立即放置于冻存管中，标记好样本名称（或编号）及类型，置于-70℃以下保存。标本应设立专库或专柜单独保存。

3. 运输

采用泡沫箱加干冰密封运输不超过5天，采用冰袋低温运输不超过3天。