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腺病毒核酸检测试剂盒(酶切探针恒温扩增法)-冻干

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所属分类:呼吸道疾病

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腺病毒核酸检测试剂盒(酶切探针恒温扩增法)-冻干

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产品简介

【产品名称】腺病毒核酸检测试剂盒(酶切探针恒温扩增法)

【包装规格】48人份/

【预期用途】

本试剂盒用于体外定性检测鼻咽拭子和咽拭子样本中的腺病毒核酸。

人腺病毒(Human adenovirusHAdV)是一种能引起人类急性呼吸道传染病的常见病原,主要通过飞沫传播和接触传播。腺病毒在自然界中广泛分布,型别多,有7个组别(A-G),对人类有致病作用的有55个血清型,其中引起人呼吸道感染的主要是B组(3型、7型、11型、14型、16型、21型、50型、55型)、C组(1型、2型、5型、6型、57型)和E组(4型)[1-8]。不同型别有不同的临床症状,但以呼吸道感染为主,其感染人体后导致的呼吸道疾病在全球呼吸道疾病中占5%15%,在全球儿童呼吸道疾病中占5%7%[9],还可以引起急性胃肠炎、流行性角膜结膜炎等。腺病毒流行地区广泛,且一年四季均可感染,特别是人群聚集区容易造成局部暴发,主要发生在学校和军营。儿童由于缺乏相应的保护性抗体,容易受到感染,从而引发比较严重的肺炎,是呼吸道腺病毒感染的重点。

本试剂盒检测结果不作为患者腺病毒感染诊断的唯一指标,须结合患者临床特征、其他实验室检查数据,正确判断病原体的感染,制定合理的治疗方案,使治疗安全、有效。

【检测原理】

试剂盒采用酶切探针恒温扩增技术(Enzymatic Probe Isothermal AmplificationEPIA),针对ADV的高度保守区域设计特异性引物与含RNA碱基的探针(rProbe),同时加入Bst酶及RNaseH酶等,其中rProbeRNA碱基左、右两端分别标记荧光基团和淬灭基团。在恒定温度下利用Bst酶的DNA聚合酶活性和链置换活性扩增待测靶标,RNaseH酶可切割靶标-探针杂交链上的RNA碱基,使得rProbe的荧光基团和淬灭基团分离从而发出荧光。此外,残留的rProbe RNA碱基左侧片段可作为引物继续延伸形成产物,使得产物进一步累积。荧光信号随着产物的形成不断累积,从而实现对目标核酸的检测。

体系中以重组的松树叶绿体基因质粒作为外源内参,作为对试剂以及操作本身的质控,避免假阴性。

【储存条件及有效期】

  1. 未开封的试剂盒:应在避光、温度不高于30℃下储存,有效期12个月。
  2. 冻干的核酸反应液、阳性对照品和内参对照品复溶后立即进行检测,未用完的复溶阳性对照品和内参对照品应避光储存于-15℃以下,有效期为1周,避免反复冻融(应不超过2次)。
  3. 运输条件: 低于37℃可稳定运输1个月。
  4. 生产日期、生产批号及失效日期见包装标签。

【适用仪器设备】

ABI 7500荧光定量PCR仪、宏石SLAN-96P全自动医用PCR分析系统、LightCycler® 480荧光定量PCR系统,实时荧光恒温检测系统Easy Amp HWTS1600

【样本要求】

  1. 样本采集
    1. 鼻咽拭子

用带有聚酯纤维尖端的拭子从前鼻孔进入,沿着下鼻道底部慢慢向后深入。当拭子顶部到达鼻咽腔后壁时(有碰壁的触感),将拭子静置片刻(约3秒),然后轻轻旋转一周,慢慢取出拭子,并将其放入管中。 用手折断塑料柄,使拭子浸入采样溶液中,并拧紧瓶盖。经验证,可用生理盐水或Hank’s液保存液保存鼻拭子样本。

    1.  咽拭子

用聚酯纤维头拭子适度用力多次抹擦悬雍垂(腭垂或小舌)后部咽后壁及双侧扁桃体,避免触及舌部,取出后置采样管,折断手接触部位的塑料柄,使拭子浸泡至采样液中,旋紧管盖。经验证,可以使用生理盐水或Hank’s液等成分的保存液保存咽拭子样本。

  1. 存放

待测样本在2-8℃保存不超过7天,-18以下保存不超过4个月,-70以下长期保存,样本应避免反复冻融。

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